如何识别并避免免疫分析中的干扰？( 三 ) 免疫分析法是使用抗体检测不

人抗小鼠抗体(HAMA)是免疫分析中最常见的干扰抗体。 HAMAs是人类抗体，具有显著的特异性，有时具有明显的小鼠抗体亲和力。患者体内产生这些抗体的原因通常是使用治疗性抗体药物治疗癌症而产生。用药后，患者的免疫系统会对这些外源性抗体产生反应，形成针对治疗性小鼠抗体的自身抗体。因此，如果免疫分析中使用小鼠抗体作为分析试剂， HAMAs会干扰免疫检测结果。在使用小鼠单克隆抗体的夹心法分析中，这可以导致捕获抗体和检测抗体之间的直接结合，而无需任何分析物(图1F) 。这会导致假阳性信号。来自不同物种的抗体序列有相似之处。这意味着，含HAMAs的血清也可能会在使用来自其他物种的抗体的检测中产生问题，并产生同样的错误信号结果。
HAMAs不仅来源于抗体治疗，长期接触家畜和宠物，最终也会形成针对这些动物的抗体。有人在患者的血清中发现了针对兔子、老鼠、狗、仓鼠的抗体。这些抗动物抗体干扰了一些具有不同亲和力和不同问题的检测抗体。一些干扰抗体不仅针对检测抗体的Fc片段，也针对检测抗体的Fab片段。这可能导致正确结合减少或完全阻碍，从而导致假阴性信号(图1G和H) 。如果HAAAs与Fc片段结合，它们被称为抗同型干扰。如果它们结合到高度可变的Fab片段上，它们就被称为抗独特型干扰。
异嗜性抗体带来的干扰
泰伯医学词典将异嗜性抗体定义为“与特定抗原以外的其他抗原结合的抗体” 。异型抗体可为IgG、IgA、IgM或IgE型。特别是IgM型在风湿病患者的血清中起着特殊的作用。这些血清中含有高浓度的所谓类风湿性因子。类风湿性因子是IgM抗体，可与人类抗体的Fc部分结合，因此也与实验中使用的抗体的Fc部分结合，且与物种无关。因此，风湿病血清将捕获与检测抗体连接起来，导致假阳性结果。这同时也是异嗜性抗体的一般干扰机制。风湿病血清的效应类似于HAAAs的效应。与HAAAs相比的区别在于异嗜性抗体的来源，他们不是建立在与动物免疫球蛋白反应的基础上，而是早期免疫应答的多特异性抗体或来源不明的干扰性抗体。
因HAAAs或异嗜性抗体造成的干扰被发现已有30多年。干扰抗体是来自动物源的一般弱结合抗体，主要干扰由于分析物浓度低，血清或血浆样本需低稀释度稀释的分析。向样本缓冲液中添加阻断物——通常是非特异性血清、抗体片段或高浓度的动物免疫球蛋白——能够通过竞争减少HAAAs或异嗜性抗体的干扰效应，但不能完全避免。
样品内源性物质带来的干扰
即使是标本中天然存在的蛋白质也会干扰免疫分析。人血清中众所周知的干扰物质有白蛋白、补体、溶菌酶和纤维蛋白原。低分子量的分析物可以与白蛋白结合，这使得抗体与分析物的结合变得困难。许多激素都与转运蛋白结合，这也可能为免疫分析带来困难。此外，许多蛋白质具有结合其他物质和蛋白质的能力。这种结合能力通常是各自蛋白质生物学功能的重要组成部分。白蛋白、补体和C反应蛋白(CRP)是多种物质的天然受体。因此，非特异性结合甚至交叉反应——如与抗体的反应一样——都是可能发生的。这使得在免疫检测中识别某些分析物变得复杂。内源性蛋白可以作为一种干扰因子与抗体结合(图1C,I-K)或掩蔽目标分析物(图1L) 。例如，溶菌酶能非特异性地与具有低等电点的蛋白质结合。因此，低等电点（约5）的抗体可以与之结合，并在捕获抗体和检测抗体之间建立桥梁。需要提到的一个重要方面是，含有大量脂质的标本的干扰，因为一些分析物是脂溶性的，且抗体与分析物之间的结合可能也会受到脂质的影响。