宠物医疗技术可以考兽医证吗动物免疫技术 _动物免疫技术

对动物免疫学的认识
1.免疫(Immunity):指生物机体识别自身和非自身物质，对自身物质形成天然免疫耐受，消除非自身物质的功能，是一种生理反应，即第二次免疫反应。防御是机体清除外来物质的一种免疫保护功能。正常抗感染)清除病原生物和中和毒素)异常(过度)过敏(超敏反应(超敏反应)(过低)免疫缺陷免疫缺陷是指机体免疫系统的免疫功能因先天性发育异常或获得性损伤而降低或缺乏的全身综合征免疫的基本概念。2、稳定人体免疫系统保持相对稳定的内环境。一种生理功能。体内老化和受损细胞异常的正常消除(过度) 。自身免疫性疾病。自身抗体或自身致敏淋巴细胞撞击其正常细胞和组织引起的病理变化或功能障碍。3、监测免疫系统免疫系统的一种生理保护功能，能够识别和清除体内的突变细胞和病毒感染细胞。正常识别和去除异常(过低)突变细胞。恶性肿瘤的持续感染。三。免疫的主要类型。1.天然免疫的定义是指机体机器与生俱来的正常生理防御功能，能够排斥和阻断各种病原微生物和异物。也叫非特异性免疫2 。获得性免疫的定义是指机体对某一类微生物或其产物的特异性抵抗力。是获得性的，也叫特异性免疫…

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请问检测动物机体免疫功能的方法都有哪些？
细胞免疫是多种细胞相互作用的结果。免疫细胞之间的相互作用导致许多细胞因子的释放。因此，细胞功能的确定不仅涉及T细胞的数量和功能，还涉及各种因子的活性。因此，评价机体的细胞免疫功能不仅复杂，而且难以标准化。首先，皮肤试验和诱发接触过敏是检测DTH的两种常用方法。在皮试中，它诱导对曾经致敏患者的抗原的再反应，而接触过敏是测试接受者对从未接触过的物质的致敏能力。1.皮肤测试。DTH是通过皮试确诊的。常用的抗原包括结核纯蛋白衍生物(PPD)、腮腺炎病毒、念珠菌素等。在人体试验中，将少量可溶性抗原注射到前臂皮肤中。24 ~ 48小时后，测量肿胀和硬结的大小。如果硬结直径大于10mm，则视为阳性。说明受试者对病原体有一定的细胞免疫力。如果皮肤试验没有反应，可以用更高浓度的抗原重复试验。如果仍然没有反应，则为阴性。皮试的技术误差应该消除。也有可能是受试者从未接触过这种抗原，或者是细胞免疫缺乏，或者是严重感染(麻疹、慢性播散性肺结核)导致的无反应。2.接触过敏通常由低分子量化合物如二硝基氯苯(DNCB)引起。该化合物与皮肤蛋白结合并导致DTH反应。在动物实验中，当DNCB第一次应用于皮肤，然后在7-10天后刺激时，皮肤是阳性的。人类不再使用这种测试。二。细胞免疫的体外检测方法在体外检测淋巴细胞的数量和功能，血液样本是最容易采集的。首先，淋巴细胞需要分离或纯化。通常，比重为1.077的淋巴细胞分层溶液是用葡甘聚糖-泛影葡胺制备的。当血液叠加在淋巴细胞分层溶液上并离心时，红细胞(1.092)、多形核白细胞(1.090)和淋巴细胞(1.00)淋巴细胞和单核细胞在血浆和分层液体的交界处形成一薄层。仔细分离这薄层中的细胞，其中淋巴细胞占80%，单核细胞占20%，淋巴细胞中T细胞占80%，B细胞占4% ~ 10%，视为非DT非B细胞。1.T细胞计数(1)E玫瑰花结法：人T细胞表面有SRBC受体(CD2)，可与SRBC结合形成玫瑰花结样结构。分层溶液分离的RBM悬液与SRBC在含血清的平衡盐水中混合，37培养5 ~ 10分钟，4过夜。取细胞悬液计数，外周血约70% ~ 80%的淋巴细胞。目前，这种方法已被用于分离T细胞，而无需计数T细胞。(2)用单克隆抗体计数T细胞：将人PBM分成三等份，用鼠抗人CD3、CD4、CD8单克隆抗体作为第一抗体与细胞结合，再用FITC标记的兔抗鼠IgG抗体作为第二抗体进行间接免疫荧光染色。荧光显微镜或流式细胞仪检测结果显示，PBMCD3抗体染色的细胞称为CD3细胞，即总T细胞。t细胞占PBM正常人的70% ~ 80% 。正常CD4细胞和CD8细胞的总和应该与CD3细胞的数量一致。正常人CD4细胞与CD8细胞的比例约为2/1，艾滋病患者低于1.7 。2.T细胞激活试验T细胞可以被一种叫做丝裂原的非特异性物质激活，转化为淋巴母细胞。t细胞转化可以伴随着DNA、RNA和蛋白质合成的增加，从而导致细胞分裂。可以在光学显微镜下计数转化的淋巴细胞的数量，或者可以用氚标记的胸苷(3HTdR)掺杂正在分裂的淋巴细胞，并且可以用液体闪烁计检查正在分裂的淋巴细胞，并且通过液体计加入3H-TdR的量来确定淋巴细胞转化率。
最近有一种不用同位素就可以用仪器测定的淋巴细胞增殖反应的检查方法，叫做MTT法。MTT是一种二唑盐，是细胞线粒体脱氢酶的底物。细胞中的酶可以分解MTT，从氮杂产物生成蓝黑色。产物的量与活性细胞的数量正相关。结果酶标检测器(595mm)可测定HSBC的密度，可作为MTT检测指标。该方法的结果与3H-TdR掺入法平行，并能反映试验中活细胞的数量(表20-3) 。表20-3淋巴细胞增殖刺激物：促分裂原T细胞B细胞植物血凝素
（PHA） + －刀豆蛋白A（ConA） + －美洲商陆（PWM） + + 葡萄球菌蛋白A（SPA） ±＊ + 副伤寒杆B（SPB） ± +注： PWH主要是T细胞分裂原，也可通过刺激T细胞分泌可溶性因子诱导B细胞增殖分化；＊SPA诱导B细胞分裂不需要T细胞协助，但诱导B细胞激活抗体分泌细胞需要T细胞协助3．细胞毒试验 TC细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞对其靶细胞有直接的细胞毒（杀伤）作用。常用的栓测细胞毒效应的方法是51Cr-Na2Cro4盐水溶液与靶细胞胞混合，于37℃培养1小时左右，51Cr即可进入靶细胞，与胞浆蛋白结合，洗去游离的51Cr后，即可得到51Cr标记的靶细胞，将待检细胞毒性的细胞与51Cr标记的靶细胞混合（比例约为50：1或100：1）靶细胞被杀伤越多，释放到上清液中的液游离的51Cr越多，且不能被其他细胞吸收。用γ射线测量仪检测上清液中的cpm值，即可计算出待检细胞杀伤活性的高低。细胞毒试验检测Tc细胞效应功能是否健全，及经IgG介导的ADCC效应，或NK细胞在抗肿瘤免疫中的作用是有意义的。4．混合淋巴细胞的反应（MIR）是体外研究T细胞的较好的方法，双向MLR常被用来筛选骨髓移植的供体。来自不同供体的淋巴细胞分别与病人的淋巴细胞混合培养4～5天，在最后8小时掺入51TdR掺入法测T细胞的反应性。或用细胞毒法观察受刺激的T细胞与活的靶细胞混合（靶细胞来自与刺激细胞相同的个体）如果T细胞受刺激后产生了细胞毒T细胞，可杀死活的细胞，根据靶细胞释放51Cr的多少算出T细胞移动抑制因子）和LIF（白细胞移动抑制因子）来评估细胞免疫功能。近年来应用测定IL-2的免疫酶技术，操作简单，并能定量以取代了MIF和LIF的测定。单个核细胞与分裂原一起培养24小时，然后测定清液中的IL-2活性。在细胞免疫功能缺损时，特别是AIDS病人，IL-2分泌明显降低。而有些疾病，如多发性硬化、类风湿关节炎、移植排斥反应等病人体内血清中IL-2水平升高，表明病人T细胞活性增高。发生移植排斥反应的病人尿中IL-2也可升高。也可用酶联免疫吸附试验测定各种体液中活化的T细胞脱落的IL-2受体（CD25），一般来说IL-2的水平和IL-2受体水平是平行的，IL-2和IL-2受体的检测可用于对某些疾病的监测，如移杆排斥、自身免疫病以及接受免疫抑制治疗的病人。对体外培养的细胞进行细胞因子产生能力检测是检查细胞培养上清液中细胞因子的生物活性或抗原性。现已可用核酸杂交技术，即从组织中或细胞中提取RNA，与同位素或酶标记的该种细胞因子的cDNA探针作分子杂交试验，即印迹（dot blotting）或Northern印迹，若查出有某种因子的mRNA存在，即说明该细胞在所处培养条件下有产生某种细胞因子的能力。简述影响动物免疫效果的因素有哪些预防兔传染病的疫苗种类很多，同种类疫苗中还有不同品种、不同毒株型号的疫苗之分。尽管许多疫苗对预防各种传染病都有一定的免疫效果，但各种疫苗应用后免疫效果的差异与多方面因素有关：兔群饲养管理水平及饲料中营养成分的平衡与否，直接影响兔体的非特异性免疫力，也间接影响疫苗的免疫效果；疫苗的种类、质量与运输、贮存条件，及操作技术是免疫效果的最基本的先决因素；母源抗体水平高低对仔兔早期应用疫苗的免疫效果有干扰；免疫程序的安排及疫苗的免疫接种方法是否合理对免疫效果有着决定性的关系；兔群的免疫状态对疫苗免疫回忆反应的作用，在不同兔群中各有不同的反应；兔群中处于免疫临界线以下易感兔的比例，对兔体免疫水平状况有密切关系；日龄因素及免疫器官的发育程度对疫苗免疫应答反应有影响；疫苗免疫接种过程中，应激因素的强弱程度，对免疫效果有很大影响；免疫兔群的隔离、消毒、卫生条件对在兔场周围或场内存在的自然野毒的感染有着不可分割的关系。

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动物的检疫方法包括哪些？动物的检疫方法包括：1、流行病学调查；2、病理检查；3、病源检查；4、免疫学检查；5、临床检查。知识点延伸：动物的检疫，就是按照国家法规对各种动物及其产品进行的疫病检查。通过动物检疫，对可疑或已证实的疫病对象实行强制隔离，或作出适当处理，目的是防止动物传染病的传播，保障畜牧业生产和人民健康。试述免疫接种在动物疫病防治上的意义。实践证明，实施动物免疫是控制疫病发生的最根本、最科学、最有效的措施，开展动物免疫抗体检测工作，及时准确地提出免疫方案，是如何做好动物免疫工作的前提和保证。开展动物免疫抗体检测的目的，就是对免疫接种后的畜禽体内采集血清进行实验室检测，及时了解疫苗注射后动物体内产生的免疫抗体水平和免疫效果，为畜禽养殖场进行补免和开展各项防控措施提供权威依据，为政府主管部门科学地制定动物疫病预防控制规划和疫病预警。因此做好检测工作有以下几方面的意义：（1 ）准确把握免疫时机。从对畜禽饲养场户检测情况来看，各个畜禽饲养场户饲养种类不同，需要的疫苗种类和免疫方法不相同。畜禽进出栏不同，造成群体免疫状况不同。另外疫病流行状况不同的影响，需要免疫注射的时间和免疫次数不同。而我们知道通常动物体内存在的抗体依据来源，主要是母源抗体水平和免疫接种后产生的抗体。当畜禽体内抗体水平过高时进行免疫么，不仅浪费疫苗，又影响免疫效果，导致免疫失败；当抗体水平较低时进行免疫，会出现抗体保护真空期，造成疫病的发生和流行。只有通过抗体检测，才能及时掌握群体免疫动态，确定免疫日期，指导适合本场的免疫程序，以发挥疫苗的理想保护作用，达到最佳的免疫效果。（2 ）全面掌握免疫效果。开展检测工作能够及时准确地掌握免疫动物整体抗体水平合格率、维持时间和免疫效果。在具体操作上，要做到：一是要在免疫前和免疫后一定时间内对免疫动物采血检测，以便了解和掌握饲养的畜禽免疫情况和免疫保护率。二是对全进全出的畜禽实施定期检测，掌握疫苗保护期，以便及时补免。三是采取随机抽样和不同批次抽样检测相结合，做到即有重点又能有代表性。四是及时分析检测结果。对发现的问题细致分析，是疫苗问题的要及时更换疫苗，是免疫接种技术问题的，要及时请教专家，严格按照技术要求操作，是疫苗相互干扰的，要合理安排接种时间，以达到疫苗接种的保护效果。（3 ）建立科学合理的免疫程序。目前随着动物及动物产品贸易更加频繁，流通渠道增多，给疫病传播、流行的客观上创造了条件。各养殖场户不能盲目地按照一个免疫程序常年变，也不能机械地仿效其他场的免疫程序进行防疫，而应该根据该场户的免疫抗体检测情况以及当地的疫病流行情况来制定合理的免疫程序，科学接种，计划免疫。免疫接种禁忌（1）过敏体质者如果注射伤寒、副伤寒、百日咳死疫苗、狂犬疫苗，异种动物血清等制剂后，有可能发生猝死，应慎用。（2）免疫缺陷病患者不可注射活疫苗制剂。如注射死疫苗或类毒素制剂，虽无危险，但不产生抗体或效果差。（3）应用免疫抑制剂的患者，只能在停药2～4周后方可接种活疫菌，但死疫苗、类毒素和抗毒素在用药期间均可接种。（4）凡高烧、严重心血管疾病、肝病、肾病、活动性?肺结核、活动性风湿病、急性传染病、严重高血压、糖尿病人，均不宜接种，以防疾病恶化。（5）孕妇也不宜注射、以防流产或早产。另外，妇女经期可暂缓注射。（6）湿疹或其他严重皮肤病患者不宜接种牛痘苗。但免疫接种禁忌也不可绝对化，在确须接种时，可采取下列措施：（1）进行被动免疫接种；（2）稀释后可小剂量多次注射；（3）于注射前两日服用抗组胺药；（4）注射前先进行皮肤检查。以上内容参考：百度百科-免疫接种

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抗原免疫动物制备血清，常用动物有哪些以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典方法。为了提高免疫效果，在免疫的时候，常辅以佐剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时间，使抗原缓慢释放，同时非特异性的促进局部吞噬细胞反应来增强动物的免疫效果。佐剂的类型较多，目前常用的还是福氏佐剂(Freund’sAdjuvant，FA) 。它是一种对大多数抗原都有效的佐剂，但由于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用。因此，福氏佐剂只能在确实需要的情况下(如使用的抗原为小分子可溶性抗原或半抗原)和强佐剂活性时使用。FA是用矿物油(石蜡油)、乳化剂(羊毛脂)和灭活的分枝杆菌(结核分枝杆菌或卡介苗)组成的油包水乳化佐剂。这三种成分俱全的佐剂称为福氏完全佐剂(Freund’sComD】eleAdjuvant，FCA)，不含分枝杆菌的佐剂为福氏不完全佐剂(Freund’sInconrpleteAdjuvant，FIA) 。石蜡油因不能代谢而存留在注射的部位，这就阻碍了抗原降解或快速反应，起到抗原储存作用，使抗原缓慢持续的释放，不断刺激机体的免疫系统而产生免疫反应。乳化剂对于水溶性抗原与油稳定地乳化是必要的。分枝杆菌具有很强的免疫刺激作用，可以非特异性的激活免疫系统。FCA用于基础注射，而FIA用于辅助注射以避免分枝杆菌蛋白引起的过敏反应。FA皮下注射或肌内注射可导致多种副作用，例如肉芽肿和无菌性脓肿的形成。腹腔注射引起腹膜炎。由于这些严重的副作用，FA不允许用于人或动物的疫苗接种免疫。传统的免疫方案，包括使用福氏佐剂和某些免疫程序，已不再被一些国家的权威机构所接受。据调查，在荷兰有64％的研究人员使用FCA，而且，用于多克隆抗体的生产方案差异很大。因此，在1993年，荷兰发布了利用动物免疫技术制备多克隆抗体的生产指南。主要规定了加强免疫注射的次数、免疫途径、注射量和佐剂的使用，并且支持使用替代佐剂来替换FCA 。由于FCA给实验动物带来的严重的副反应，对它的使用提出了特别的限制，规定了(小鼠和大鼠sc：0．1nd；i．d：家兔0．o5rI1l；i．P：小鼠0．2nd)推荐使用量和注射途径。【宠物医疗技术可以考兽医证吗动物免疫技术】

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