这个用于Syber Green实时PCR 。
而使用探针的不需要 。因为Syber Green是非特异性结合,所以如果有非特异性的序列被扩增,也会同样产生信号 。在设计引物的时候,可以计算出被扩增序列的Tm 。PCR反应完成以后,开始进行解离曲线的测量 。一般是对反应产物逐步加温,每增加一度,测信号一次 。PCR产物会在温度达到TM时发生解离,荧光信号会一下子消失、如果把温度和荧光信号的变化做一个图,就会看到一开始,荧光信号没有变化,是一个平直的线 。达到TM附近是,会有一个比较锐利的峰,说明信号的变化很大,继续加热超过TM,这是双链都打开了 。所以信号也不会再有变化,所以又是平直的线 。如果产物都是特异性的,就是我上面说的那样 。如果有非特异性产物,就会出现不在TM就出现峰值,或者有矮而胖的峰值等等异常情况出现,这样,那个管子的样本就不能用了 。
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rfu是什么实验?
RFU是relative fluorescence units (相对荧光单位)的意思,在机械加工领域RFU值常被用于做表面残留污染物检测,在生物医学领域也会利用RFU值进行疾病诊断 。
【什么是实时荧光定量pcr,rfu是什么实验?】如果是用于做零件加工检测的使用SITA清洁度仪测试,如果是生物医学领域的可用PCR仪进行测试 。
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