韩春雨，时隔六年再发高分论文金磊博雯发自凹非寺量子位|公

金磊博雯发自凹非寺
量子位|公众号QbitAI
时隔6年， “韩春雨”这个名字，再次跃入大众视线。

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六年前（2016年），他凭借一把基因“新剪刀”NgAgo登上NatureBiotechnology 。
因技术所具备的极高研究、商业价值，可谓是迅速走红：
诺奖级学者、秒杀半数以上CNS（三大顶刊简称）文章、为基因组工程开辟了一个新篇章……
然而震惊国内外之际， “实验无法复现”的声音却接踵而至，被众多学者质疑其实验的真实性。
最终，事件延续三年之久，最终以河北科技大学官方宣布“非主观造假”、Nature子刊撤稿收场。
而就在最近，一篇通讯作者名为韩春雨的高分论文，悄然登上了OxfordAcademic旗下期刊NAR（影响因子16.971）：

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论文第一作者依旧为河北科技大学的高峰（他在6年前那篇著名的NgAgo论文中同样担任一作）。
于是，在这样一个“大背景”之下，韩春雨的新研究迅速引发了高度关注：

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虽然这篇论文主要内容与此前的争议并无太大关联——提出的是一种新的RNA追踪技术。
但有过此前“实验无法重复”的经历，此次的新研究似乎依旧无法逃出这个热议之词的阴影。
那么韩春雨时隔六年的研究具体讲了什么？
时隔六年的新研究
从论文的摘要中可以看出，团队提出了一种高度灵敏性和特异性的新的RNA追踪平台。
RNA追踪是生物医学实验中非常重要的一环，科学家们常常通过追踪RNA的活动轨迹，或查看RNA的分布来分析活细胞中的多个生命流程。
在追踪之前，首先要做的就是对目标RNA进行“点亮” ，即让一些特殊的分子与RNA结合，从而发出荧光。

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然而，不管是广泛使用的MS2-MCP技术，还是Cas9/Cas13平台都存在着高背景噪音（HighBackgroundNoise）的问题。
而韩春雨团队在论文中提到，他们设计的RNA追踪平台可以做到“检测目标RNA而几乎没有背景噪声” 。
这是一个基于Cas的RNA追踪平台：Cas6FC 。
Cas6是一种2008年被发现的保护细胞免受入侵伤害的核酸酶，具有RNA结合和剪切能力。
韩春雨团队注意到， Cas6在与RNA上的Cas6结合位点（CBS）结合时，会产生结构变化。
因此，他们基于这一特点，先对大肠杆菌Cas6（EcCas6）的关键残基进行突变，得到仅具备RNA结合能力的dEcCas6：

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然后，在EcCas6蛋白N端和C端分别融合被分割开的荧光蛋白片段（SplitVenus），得到一个新的嵌合体示踪蛋白：VN-dEcCas6-NC 。
当VN-dEcCas6-NC特异性结合CBS时， dEcCas6就会发生构象重排，并释放荧光：

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在后续实验中，韩春雨团队证明， Cas6FC具有高度的敏感性，只需要在目标RNA上标记一个反应原件，就能“打开”Cas6FC荧光开关，从而“点亮”RNA 。

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对这一实验结果，韩春雨表示， Cas6FC可以解决此前RNA追踪面临的高背景噪音的困难，但也承认实验做得“并不丰满”：