悬尾实验|一种筛选抗抑郁活性的非常灵敏的行为学检测方法
FXS小鼠模型的行为学研究主要集中在学习记忆能力、活动能力、社会关系、焦虑、运动能力、感觉刺激等方面 。 悬尾实验是将动物的头朝下悬挂 , 为了克服不正常的体位 , 动物们首先会激烈地挣扎着逃跑 。 他们努力了之后 , 还是无法走出困境 , 出现间歇性的一动不动 , 呈现出一种“行为绝望”的状态 。 绝望反映了一种叫做“行为绝望”的状态 。 这种行为绝望与人类抑郁的成分相似 , 不动潜伏期可作为FST评价实验动物抑郁样绝望行为一致性的稳定参数 。
实验仪器
悬尾实验装置及其分析系统购自上海欣软信息科技有限公司 。 t技术指标:自动观察通道数:6只小鼠;采样率:最大30fps图像分辨率:640×480;单通道尺寸:老鼠:300毫米(长)×200毫米(宽)×350毫米(高) 。
测试方法
用胶带将鼠标尾部约1cm固定在磁铁上 , 使其头部下垂 。 同时注意保证悬挂时除了尾巴和仪器外 , 小鼠身体的其他部位不能接触到尾部悬挂器 , 并记录动物在这种环境下绝望不动期间的一系列参数 。 主要观察指标:休息时间、活动时间、休息时间百分比、活动时间百分比 。
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悬尾实验 , 软件:VisuTrack动物行为分析软件(上海欣软)
悬尾实验结果
该实验用时为5分钟 , 观测窗宽100 , 观测窗高140 , 降噪参数10 , 活动阈值15 。 实验动物数量为30只四周龄KO小鼠 , 其中雄雌各半和30只四周龄WT小鼠 , 其中雄雌各半;30只六周龄KO小鼠 , 其中雄雌各半和30只六周龄WT小鼠 , 其中雄雌各半;30只八周龄KO小鼠 , 其中雄雌各半和30只八周龄WT小鼠 , 其中雄雌各半 。 同组小鼠进行不同实验应相隔2天 。 经过图像运动解析仪、图像采集分析仪自动检测小鼠运动状况得出的实验数据经过整理分析 , 各组小鼠悬尾实验的结果见表1 。
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实验结论
悬尾实验 , 是一种抗抑郁药物活性筛选非常灵敏的行为学检测方法 , 也可用于抑郁症病理生理机制的研究 。 自1985年提出以来 , 由于其快速性和方便性 , 得到了广泛的接受和应用 。 目前普遍认为 , 这种行为绝望与人类抑郁症的成分相似 。 早期的挂尾实验 , 大多是人工计时 , 工作量大 , 客观性不强 , 无法定量分析动物的挣扎强度 。 随着信息、计算机、电子工程和药理学的交叉融合 , 其自动测量方法逐渐发展起来 。 我们所采用的悬尾实验的数据采集由图像运动分析仪和图像采集分析仪自动检测 , 实现了实验过程的自动化 , 提取了客观的定量数据 , 避免了人工操作 。
计数的主观误差和对实验动物的干扰增加了实验结果的客观性和可靠性 。 它比过去人工观察更灵敏、更客观 。 可以更全面的评价动物活动的特征 , 实验中不存在时间效应 , 即在一天的不同时间进行实验 , 结果基本相同 。
社交异常和焦虑是FXS患者的常见表现 。 本实验采用悬尾实验对4~8周龄的KO和WT小鼠进行观察 。 结果发现 , 同年龄同性别的KO小鼠比WT小鼠有更长的休息时间 。 同龄KO母鼠的休息时间比公鼠长 , 但差别不大 。 随着年龄的增长 , 各品系小鼠的休息时间增加 , 但KO小鼠的休息时间仍比WT小鼠长 。 提示KO小鼠的这种行为类似于人类的抑郁症 , 具有抑郁样行为 。 与国外的研究结果一致 , 因此对FXS患者的治疗不仅要给予药物 , 在护理上也要密切注意情绪观察和护理 。
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