细菌保存于穿刺培养物的优点 细菌的保存方法


细菌保存于穿刺培养物的优点 细菌的保存方法

文章插图
1.细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年 。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落 , 针缓慢穿过琼脂到达瓶底 , 连续几次 , 盖上瓶盖拧紧 , 做好标记 。室温下存放于暗处 。(最好一点可以将瓶盖放松 , 在适当温度下培养过夜 , 再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜 , 室温或最好在4度避光保存) 。
2.细菌保存于含有甘油的培养物中:(1):在液体培养基中生长的细菌培养物:取0.85ml细菌培养物 , 加入0.15ml高压灭菌甘油 , 振荡培养物使甘油分布均匀 , 然后转移到标记好的保存管内 , 密封 , 在乙醇-干冰或液氮中冻结后再转至-70度长期保存 。在复苏时 , 用灭菌接种针刮取冻结的培养物表面 , 然后立即把黏附于接种针上的细菌划于含适当抗生素的LB琼脂平板表面 , 于37度过夜 。
【细菌保存于穿刺培养物的优点 细菌的保存方法】(2):在琼脂平板上生长的细菌培养物:从琼脂平板表面刮下细菌放入装有2mlLB的无菌试管内 , 再加入等量的含有30%灭菌甘油的LB培养基 , 振荡使甘油完全分布均匀后 , 分装于无菌保存管内 , 密封 , 再按前述方法冰冻保存 。这一方法的优点在于可用于保存在质粒载体上建立的cDNA文库 。