什么是核酸的杂交,aso探针杂交技术的检测原理?

不同的DNA片段之间,DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性,形成新的双螺旋结构 。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交 。
分子杂交(molecular hybridization)确定单链核酸碱基序列的技术 。其基本原理是待测单链核酸与已知序列的单链核酸(叫做探针)间通过碱基配对形成可检出的双螺旋片段 。这种技术可在DNA与DNA,RNA与RNA,或DNA与RNA之间进行,形成DNA-DNA,RNA-RNA或RNA-DNA等不同类型的杂交分子 。

什么是核酸的杂交,aso探针杂交技术的检测原理?

文章插图
aso探针杂交技术的检测原理?
基因探针的原理:


基因探针即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA) 。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来 。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:


应带有容易被检测的标记 。


它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA 。


基因探针的本质:


基因探针的本质是一段核酸序列(DNA或RNA) 。


基因探针一般包括DNA探针和RNA探针两种 。


基因探针的核苷酸顺序是已知的,与目的基因互补 。一般用同位素或荧光标记 。


DNA分子作探针进行检测时应检测单链,即应将双链DNA分子打开 。


基因探针的来源:


【什么是核酸的杂交,aso探针杂交技术的检测原理?】DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针;另一种是从相应的基因转录获得了mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针 。与基因组探针不同的是,cDNA探针不含有内含子序列 。此外,还可在体外人工合成碱基数不多的与基因序列互补的DNA片段,称为寡核苷酸探针 。